Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh waktu penyiangan dan periode kritis terhadap gulma pada pertumbuhan dan hasil kedelai kultivar Dena 2. Penelitian ini dilaksanakan di Desa Mekarjaya, Kecamatan Gantar, Kabupaten Indramayu, pada bulan September sampai bulan Desember 2023. Metode yang digunakan adalah metode ekperimen dengan Rancangan Acak Kelompok (RAK). Perlakuan yang diuji adalah waktu penyiangan gulma kedelai (B), yang terdiri dari sembilan taraf perlakuan, yaitu: B1 = tanpa gulma, B2 = penyiangan gulma umur 3 MST, B3 = penyiangan gulma umur 4 MST, B4 = penyiangan gulma umur 5 MST, B5 = penyiangan gulma umur 6 MST, B6 = penyiangan gulma umur 7 MST, B7 = penyiangan gulma umur 8 MST, B9 = tidak disiang. Semua perlakuan diulang tiga kali, sehingga terdapat 27 satuan petak percobaan. Hasil penelitian menunjukkan perlakuan waktu penyiangan berpengaruh terhadap indeks luas daun, laju pertumbuhan tanaman, nisbah pupus akar, umur berbunga, jumlah polong pertanaman, bobot 100 butir biji, bobot biji per tanaman, dan bobot biji per petak. Perlakuan waktu penyiangan menunjukkan Periode kritis tanaman kedelai kultivar Dena 2 terjadi pada 0 - 9 MST dengan tingkat kehilangan hasil akibat persaingan dengan gulma sebesar 8.87% hingga 27%.